Establishment of a reverse genetics system for SARS-CoV-2 using circular polymerase extension reaction
Rattachement africain : jp. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) has been identified as the causative agent of coronavirus disease 2019 (COVID-19). Although multiple mutations have been observed in SARS-CoV-2, functional analysis of each mutation of SARS-CoV-2 has been limited by the lack of convenient mutagenesis methods. In this study, we establish a PCR-based, bacterium-free method to generate SARS-CoV-2 infectious clones. Recombinant SARS-CoV-2 could be rescued at high titer with high accuracy after assembling 10 SARS-CoV-2 cDNA fragments by circular polymerase extension reaction (CPER) and transfection of the resulting circular genome into susceptible cells. The construction of infectious clones for reporter viruses and mutant viruses could be completed in two simple steps: introduction of reporter genes or mutations into the desirable DNA fragments (∼5,000 base pairs) by PCR and assembly of the DNA fragments by CPER. This reverse genetics system may potentially advance further understanding of SARS-CoV-2.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Establishment of a reverse genetics system for SARS-CoV-2 using circular polymerase extension reaction
- Date Crossref
- 01/04/2021
- Éditeur
- Elsevier BV
- Type
- journal-article
Ce recoupement confirme des métadonnées liées au DOI. Il ne confirme ni la méthode ni les conclusions de l’étude, et il ne compte pas comme une seconde source scientifique indépendante.
Où se fait cette recherche
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The University of Osaka pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Hokkaido University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Gunma University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Osaka University Department of Molecular Virology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Graduate School of Medicine Department of Microbiology and Immunology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
The University of Osaka, Hokkaido University et Gunma University, avec 2 autres affiliations.
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