Direct Readout of Neural Stem Cell Transgenesis with an Integration-Coupled Gene Expression Switch
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Le résumé fourni par la source
Stable genomic integration of exogenous transgenes is essential in neurodevelopmental and stem cell studies. Despite tools driving increasingly efficient genomic insertion with DNA vectors, transgenesis remains fundamentally hindered by the impossibility of distinguishing integrated from episomal transgenes. Here, we introduce an integration-coupled On genetic switch, iOn, which triggers gene expression upon incorporation into the host genome through transposition, thus enabling rapid and accurate identification of integration events following transfection with naked plasmids. In vitro, iOn permits rapid drug-free stable transgenesis of mouse and human pluripotent stem cells with multiple vectors. In vivo, we demonstrate faithful cell lineage tracing, assessment of regulatory elements, and mosaic analysis of gene function in somatic transgenesis experiments that reveal neural progenitor potentialities and interaction. These results establish iOn as a universally applicable strategy to accelerate and simplify genetic engineering in cultured systems and model organisms by conditioning transgene activation to genomic integration.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Direct Readout of Neural Stem Cell Transgenesis with an Integration-Coupled Gene Expression Switch
- Date Crossref
- 01/08/2020
- Éditeur
- Elsevier BV
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Centre National de la Recherche Scientifique pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Institut de la Vision pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Inserm pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Sorbonne Université Institut du Fer à Moulin pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Institut du Fer à Moulin pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Institut Pasteur Early Mammalian Development and Stem Cell Biology pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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Biologie du Développement et Cellules Souches pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Université Paris Sciences et Lettres pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Institut de Biologie de l'École Normale Supérieure pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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PSL Université Paris Institut de Biologie de l'Ecole Normale Supérieure (IBENS) pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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