Extracellular calcium influx activates adenylate cyclase 1 and potentiates insulin secretion in MIN6 cells
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Le résumé fourni par la source
Intracellular cAMP and Ca(2+) are important second messengers that regulate insulin secretion in pancreatic β-cells; however, the molecular mechanism underlying their mutual interaction for exocytosis is not fully understood. In the present study, we investigated the interplay between intracellular cAMP and Ca(2+) concentrations ([cAMP](i) and [Ca(2+)](i) respectively) in the pancreatic β-cell line MIN6 using total internal reflection fluorescence microscopy. For measuring [cAMP](i), we developed a genetically encoded yellow fluorescent biosensor for cAMP [Flamindo (fluorescent cAMP indicator)], which changes fluorescence intensity with cAMP binding. Application of high-KCl or glucose to MIN6 cells induced the elevation of [cAMP](i) and exocytosis. Furthermore, application of an L-type Ca(2+) channel agonist or ionomycin to induce extracellular Ca(2+) influx evoked the elevation of [cAMP](i), whereas application of carbachol or thapsigargin, which mobilize Ca(2+) from internal stores, did not evoke the elevation of [cAMP](i). We performed RT (reverse transcription)-PCR analysis and found that Ca(2+)-sensitive Adcy1 (adenylate cyclase 1) was expressed in MIN6 cells. Knockdown of endogenous ADCY1 by small interference RNA significantly suppressed glucose-induced exocytosis and the elevation of both [cAMP](i) and [Ca(2+)](i). Taken together, the findings of the present study demonstrate that ADCY1 plays an important role in the control of pancreatic β-cell cAMP homoeostasis and insulin secretion.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Extracellular calcium influx activates adenylate cyclase 1 and potentiates insulin secretion in MIN6 cells
- Date Crossref
- 15/02/2013
- Éditeur
- Portland Press Ltd.
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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RIKEN Center for Brain Science pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Japan Science and Technology Agency ERATO pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Waseda Bioscience Research Institute in Singapore pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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The University of Tokyo pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Waseda University Waseda Bioscience Research Institute in Singapore (WABOIS) pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Laboratory for Cell Function and Dynamics pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Graduate School of Arts and Sciences Department of Life Sciences pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
RIKEN Center for Brain Science, ERATO — Japan Science and Technology Agency et Waseda Bioscience Research Institute in Singapore, avec 4 autres affiliations.
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