Fast volumetric fluorescence lifetime imaging of multicellular systems using single-objective light-sheet microscopy
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Le résumé fourni par la source
Fluorescence lifetime imaging (FLIM) is widely used for functional and multiplexed bioimaging. The lifetime of autofluorescence or fluorescent sensors encodes physiologically relevant parameters. Thus, FLIM is especially relevant for the investigation of living systems. However, application of FLIM to live specimen is hampered by its slow speed and high phototoxicity. To enable faster and gentler FLIM, we integrated single-objective light-sheet microscopy with pulsed excitation and time-resolved detection on a novel SPAD array detector. We achieved 10-100-fold acceleration compared to confocal FLIM, down to 100 ms acquisition time per image, with excellent quantitative agreement. The massively enhanced speed enables volumetric FLIM acquisitions on live multicellular specimens, which we demonstrate with lifetime-based multiplexing in 3D and time-lapse FLIM of tension probes on living embryonic organoids. We benchmark both scanned and static light-sheet modalities to facilitate adding FLIM capability to a large variety of light-sheet microscopes.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Fast volumetric fluorescence lifetime imaging of multicellular systems using single-objective light-sheet microscopy
- Date Crossref
- 29/11/2025
- Éditeur
- Springer Science and Business Media LLC
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Centre National de la Recherche Scientifique pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Aix-Marseille Université LIS - Laboratoire d'Informatique et des Systèmes (LIS) (Marseille pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Laboratoire d’Informatique et Systèmes pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Institut de Biologie du Développement Marseille pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Living Systems (United States) pays non établi dans la noticeEntreprise
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Charité - Universitätsmedizin Berlin pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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University of Nottingham pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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PicoQuant (Germany) pays non établi dans la noticeEntreprise
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University of Birmingham pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Université de Bordeaux pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Institut Interdisciplinaire de Neuroscience pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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National University of Singapore Biomedical Engineering Department pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
Centre National de la Recherche Scientifique, LIS - Laboratoire d'Informatique et des Systèmes (LIS) (Marseille — Aix-Marseille Université et Laboratoire d’Informatique et Systèmes, avec 9 autres affiliations.
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