Consensus guidelines for cellular label-free optical metabolic imaging: ensuring accuracy and reproducibility in metabolic profiling
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Le résumé fourni par la source
Significance: Cellular metabolism plays a central role in health and disease, making its study critical for advancing diagnostics and therapies. Label-free optical metabolic imaging using endogenous fluorescence from reduced nicotinamide adenine dinucleotide (phosphate) [NAD(P)H] and flavin adenine dinucleotide (FAD) provides nondestructive, high-resolution insights into metabolic function and heterogeneity from the sub-cellular to the tissue level. Standardized approaches are essential to ensure reproducibility and comparability across studies. Aim: We aim to establish a consensus framework for the acquisition, calibration, and reporting of microscopic imaging metabolic function assessments based on fluorescence intensity and lifetime measurements of NAD(P)H and FAD. Approach: We present best practices for calibrating, analyzing, and reporting fluorescence intensity-based optical redox ratios and fluorescence lifetime data using multiexponential fitting and phasor analysis. Guidelines for validation experiments and cross-system standardization are provided to improve accuracy and reproducibility. Results: We demonstrate the importance of calibration procedures and normalization strategies for intensity-based optical redox measurements. We highlight needed calibration, signal-to-noise ratio considerations, and the impact of distinct analytical approaches on fluorescence lifetime-based metabolic function metrics. Conclusion: We recommend a consistent, practical framework for reproducible, label-free, optical metabolic imaging, facilitating robust comparisons across studies and supporting the broader adoption of optical metabolic imaging technologies for biomedical research and clinical translation.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Consensus guidelines for cellular label-free optical metabolic imaging: ensuring accuracy and reproducibility in metabolic profiling
- Date Crossref
- 12/11/2025
- Éditeur
- SPIE-Intl Soc Optical Eng
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Dartmouth College pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Tufts University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Dartmouth Institute for Health Policy and Clinical Practice pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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Dartmouth Psychiatric Research Center pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Morgridge Institute for Research pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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University of Arkansas at Fayetteville pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Centre National de la Recherche Scientifique pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Inserm pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Washington University in St. Louis pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of Minnesota pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of Pennsylvania pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of Wisconsin System pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
Dartmouth College, Tufts University et Dartmouth Institute for Health Policy and Clinical Practice, avec 9 autres affiliations.
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