Strand displacement‐driven CRISPR/Cas12a framework enables precise identification of low‐abundance point mutations
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Le résumé fourni par la source
Abstract Accurate identification of low‐abundance point mutations is a crucial technical challenge in clinical diagnosis, particularly within high wild‐type genomic backgrounds. We established an engineered Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR) and CRISPR‐associated 12a proteins (Cas12a) point mutation detection strategy (E‐CRISPR) for low‐abundance point mutations detection. By integrating the precise regulatory mechanism of strand displacement reaction (SDR) with the local high‐concentration probe microenvironment created by tetrahedral DNA frameworks (TDFs), it has achieved simultaneous improvement in single‐nucleotide resolution and ultrasensitive detection performance. This strategy was validated using the mitochondrial m.11778G>A mutation associated with Leber's hereditary optic neuropathy and achieved a detection limit of 0.1% mutant allele frequency under isothermal conditions within 20 min. This approach represents a clinically versatile mutation diagnosis strategy with high sensitivity and specificity, which provides an innovative solution to break through the existing technical bottlenecks.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Strand displacement‐driven CRISPR/Cas12a framework enables precise identification of low‐abundance point mutations
- Date Crossref
- 04/06/2025
- Éditeur
- Wiley
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Affiliated Hospital of Southwest Medical University pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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Chongqing University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Chinese University of Hong Kong pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Qianjiang Central Hospital pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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Kunming Medical University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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School of Medicine Department of Laboratory Medicine Chongqing General Hospital pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
Affiliated Hospital of Southwest Medical University, Chongqing University et Chinese University of Hong Kong, avec 3 autres affiliations.
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