Microfluidics combined with electron microscopy for rapid and high-throughput mapping of antibody–viral glycoprotein complexes
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Le résumé fourni par la source
Understanding the mechanistic interplay between antibodies and invading pathogens is essential for vaccine development. Current methods are labour and time intensive and limited by sample preparation bottlenecks. Here we present microfluidic electron microscopy-based polyclonal epitope mapping (mEM), which combines microfluidics with single-particle electron microscopy for the structural characterization of immune complexes using small volumes of sera (<4 µl). First, we used mEM to map polyclonal antibodies present in sera from infected and vaccinated individuals against five viral glycoproteins using negative-stain electron microscopy. The mEM detected a greater number of epitopes compared with conventional polyclonal epitope structural mapping methods. Second, we used mEM and cryo-electron microscopy to characterize two coronavirus spikes and one HA glycoprotein with and without polyclonal antibodies. Finally, we mapped individual antibody responses over time in mice vaccinated with human immunodeficiency virus envelope N332-GT5. mEM enables the rapid, high-throughput mapping of antibodies targeting a broad range of glycoproteins, facilitating a better understanding of infection and guiding structure-based vaccine design.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Microfluidics combined with electron microscopy for rapid and high-throughput mapping of antibody–viral glycoprotein complexes
- Date Crossref
- 03/06/2025
- Éditeur
- Springer Science and Business Media LLC
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Scripps Research Institute Department of Integrative Structural and Computational Biology pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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University of California Department of Surgery pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Ragon Institute of MGH pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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Massachusetts General Hospital pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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Yale University Department of Medicine pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of California San Diego pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Massachusetts Institute of Technology Department of Biology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Ragon Institute of Mass General pays non établi dans la noticeStructure de recherche
Department of Integrative Structural and Computational Biology — Scripps Research Institute, Department of Surgery — University of California et Ragon Institute of MGH, avec 5 autres affiliations.
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