Intensity Modulation of Trichromatic Split Fluorescent Proteins for Live Cell Mapping
Rattachement africain : jp, us. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
Abstract Multiplexed live cell-labeling technologies are essential tools for investigating complex biological systems, yet existing approaches face limitations in achieving reliable discrimination of multiple cell populations. Here, we present color and intensity modulation with split fluorescent proteins for cell labeling (Caterpie), a live cell labeling system that enables high-fidelity identification of multiple cell populations through rational design of split fluorescent proteins. Drawing inspiration from human trichromatic vision, we engineered optimized split fluorescent protein variants—split CFP2, split mNG3A, and split sfCherry3C—and developed a comprehensive library of the 11th β-strand (FP 11 ) tags comprising variable numbers of tandem repeats. Structure-guided protein engineering enhanced the performance of split mNG3A and split sfCherry3C through targeted modifications of their C-terminal sequences and binding interfaces, respectively. By systematically varying the composition and arrangement of FP 11 repeats, we selected 20 distinct FP 11 tags that enable robust cell population discrimination with 97% accuracy using conventional fluorescence microscopy. In these FP 11 tag-expressing cells, we expressed multiple EGF ligands and their receptors and cultured them in bulk to examine the effects of EGF signaling on chemotaxis within the cell population. The results showed that chemotaxis changes according to the intensity of EGFR signaling. The Caterpie system holds significant potential for applications requiring precise identification and tracking of multiple cell populations in complex biological systems.
Ce résumé expose les affirmations des auteurs. BNTIC ne l’interprète pas comme une validation indépendante des résultats.
Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Intensity Modulation of Trichromatic Split Fluorescent Proteins for Live Cell Mapping
- Date Crossref
- 14/05/2025
- Éditeur
- openRxiv
- Type
- posted-content
Ce recoupement confirme des métadonnées liées au DOI. Il ne confirme ni la méthode ni les conclusions de l’étude, et il ne compte pas comme une seconde source scientifique indépendante.
Où se fait cette recherche
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Kyoto University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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The University of Tokyo Institute of Industrial Science pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of North Carolina at Chapel Hill Lineberger Comprehensive Cancer Center pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Nagoya University Center for One Medicine Innovative Translational Research (COMIT) pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Tokushima University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of Yamanashi pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Graduate School of Biostudies pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of North Carolina School of Medicine Department of Biochemistry and Biophysics pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Graduate School of Medicine Affiliate Graduate School pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
Kyoto University, Institute of Industrial Science — The University of Tokyo et Lineberger Comprehensive Cancer Center — University of North Carolina at Chapel Hill, avec 6 autres affiliations.
Une affiliation ne permet pas de déduire la nationalité d’un auteur.