Engineering an Escherichia coli strain for production of long single-stranded DNA
Rattachement africain : us. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
Abstract Long single-stranded DNA (ssDNA) is a versatile molecular reagent with applications including RNA- guided genome engineering and DNA nanotechnology, yet its production is typically resource-intensive. We introduce a novel method utilizing an engineered E. coli “helper” strain and phagemid system that simplifies long ssDNA generation to a straightforward transformation and purification procedure. Our method obviates the need for helper plasmids and their associated contamination by integrating M13mp18 genes directly into the E. coli chromosome. We achieved ssDNA lengths ranging from 504 to 20,724 nucleotides with titers up to 250 μg/L following alkaline-lysis purification. The efficacy of our system was confirmed through its application in primary T cell genome modifications and DNA origami folding. The reliability, scalability, and ease of our approach promises to unlock new experimental applications requiring large quantities of long ssDNA.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Engineering an Escherichia coli strain for production of long single-stranded DNA
- Date Crossref
- 27/02/2024
- Éditeur
- openRxiv
- Type
- posted-content
Ce recoupement confirme des métadonnées liées au DOI. Il ne confirme ni la méthode ni les conclusions de l’étude, et il ne compte pas comme une seconde source scientifique indépendante.
Où se fait cette recherche
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University of California Department of Cellular and Molecular Pharmacology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Gladstone Institutes pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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Lawrence Berkeley National Laboratory Biological Systems & Engineering Division pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Gladstone-UCSF Institute of Genomic Immunology pays non établi dans la noticeStructure de recherche
Department of Cellular and Molecular Pharmacology — University of California, Gladstone Institutes et Biological Systems & Engineering Division — Lawrence Berkeley National Laboratory, avec 1 autre affiliation.
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