Einfache, kostengünstige und gut funktionierende Methode zur Isolierung von Epithelzellen aus Nasenpolypen mit Outgrowth-Technik

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Hintergrund Epithelzellen (EC) sind ein wichtiger Bestandteil des Pathomechanismus der Typ-2-Inflammation bei chronischer Rhinosinusitis mit Nasenpolypen. Es ist daher wichtig, eine robuste Methode zur Isolierung und Kultur von EC aus Nasenpolypen zu etablieren, um weitere Untersuchungen zu ermöglichen. In dieser Studie wurde die Realisierbarkeit der Outgrowth-Technik zur Isolierung der EC aus Nasenpolypen evaluiert. Methoden Zur Isolierung der EC aus Nasenpolypen (n = 3) wurde die Outgrowth-Technik durchgeführt. Die Proliferation der isolierten EC wurde in der Zellkultur bis zur 3. Passage evaluiert. Mittels Durchflusszytometrie mit Anti-Cytokeratin, Anti-p63 und Anti-Ki-67 wurden EC identifiziert und deren Differenzierung und Proliferation beurteilt. Ein Funktionstest wurde durch die Bestimmung von relevanten Proteinen der Typ-2-Inflammation mittels ELISA, repräsentativ Interleukin-33 und Periostin, durchgeführt. Ergebnisse Mittels Outgrowth-Technik konnten aus allen Gewebeproben EC isoliert werden. Isolierte EC zeigten bis zur 3. Passage alle 6 Tage eine Proliferationsrate von ca. 7- bis 23-fach (13,48 ± 1,753). In der Durchflusszytometrie wurde gezeigt, dass über 97 % der isolierten Zellen (97.02 ± 0.2194%) Zytokeratin- und p63-positiv und über 86 % von ihnen (86.45 ± 2.532%) Ki-67-positiv waren. Im überstand waren Interleukin-33 und Periostin nachweisbar. Schlussfolgerungen Mit der Outgrowth-Technik stellen wir eine einfache, kostengünstige und gut funktionierende Methode zur Isolierung von EC aus Nasenpolypen vor. Publication History Article published online: 12 May 2023 Georg Thieme Verlag Rüdigerstraße 14, 70469 Stuttgart, Germany

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