The Distinctive Activation of Toll-Like Receptor 4 in Human Samples with Sepsis
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Le résumé fourni par la source
Clinical success of Toll-Like receptor-4 (TLR-4) antagonists in sepsis therapy has thus far been lacking. As inhibition of a receptor can only be useful if the receptor is active, stratification of patients with active TLR-4 would be desirable. Our aim was to establish an assay to quantify phosphorylated TLR-4 using the proximity ligation assay (PLA). HEK293 TLR4/MD2/CD14 as well as THP-1 cells were stimulated with LPS and the activation of TLR-4 was measured using the PLA. Furthermore, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from 25 sepsis patients were used to show the feasibility of this assay in clinical material. Activation of TLR-4 in these samples was compared to the PBMCs of 11 healthy individuals. We could show a transient activation of TLR-4 in both cell lines. Five min after the LPS stimulation, the signal increased 6.7-fold in the HEK293 cells and 4.3-fold in the THP-1 cells. The assay also worked well in the PBMCs of septic patients. Phosphorylation of TLR-4 at study inclusion was 2.9 times higher in septic patients compared to healthy volunteers. To conclude, we established a diagnostic assay that is able to quantify the phosphorylation of TLR-4 in cell culture and in clinical samples of sepsis patients. This makes large-scale stratification of sepsis patients for their TLR-4 activation status possible.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- The Distinctive Activation of Toll-Like Receptor 4 in Human Samples with Sepsis
- Date Crossref
- 27/09/2022
- Éditeur
- MDPI AG
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Universitätsklinikum Knappschaftskrankenhaus Bochum pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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Ruhr University Bochum Molekulare Immunologie pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University Hospital Münster pays non établi dans la noticeÉtablissement de santé
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University of Duisburg-Essen pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Klinik für Anästhesiologie pays non établi dans la noticeInstitution
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University Hospital Essen Department of Anesthesiology and Intensive Care Medicine pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
Universitätsklinikum Knappschaftskrankenhaus Bochum, Molekulare Immunologie — Ruhr University Bochum et University Hospital Münster, avec 3 autres affiliations.
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