Stable transformation of Babesia bigemina and Babesia bovis using a single transfection plasmid
Rattachement africain : us, au. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
Babesia bigemina and Babesia bovis, are the two major causes of bovine babesiosis, a global neglected disease in need of improved methods of control. Here, we describe a shared method for the stable transfection of these two parasites using electroporation and blasticidin/blasticidin deaminase as a selectable marker. Stably transfected B. bigemina and B. bovis were obtained using a common transfection plasmid targeting the enhanced green fluorescent protein-BSD (egfp-bsd) fusion gene into the elongation factor-1α (ef-1α) locus of B. bigemina and B. bovis under the control of the B. bigemina ef-1α promoter. Sequencing, Southern blotting, immunoblotting and immunofluorescence analysis of parasite-infected red blood cells, demonstrated that the egfp-bsd gene was expressed and stably integrated solely into the ef-1α locus of both, B. bigemina and B. bovis. Interestingly, heterologous B. bigemina ef-1α sequences were able to drive integration into the B. bovis genome by homologous recombination, and the stably integrated B. bigemina ef-1α-A promoter is fully functional in B. bovis. Collectively, the data provides a new tool for genetic analysis of these parasites, and suggests that the development of vaccine platform delivery systems based on transfected B. bovis and B. bigemina parasites using homologous and heterologous promoters is feasible.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Stable transformation of Babesia bigemina and Babesia bovis using a single transfection plasmid
- Date Crossref
- 17/04/2018
- Éditeur
- Springer Science and Business Media LLC
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Washington State University Department of Veterinary Microbiology and Pathology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Agricultural Research Service pays non établi dans la noticeOrganisme public
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United States Department of Agriculture pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Australian Regenerative Medicine Institute pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Monash University Department of Microbiology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Animal Disease Research Unit pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Kimron Veterinary Institute Division of Parasitology pays non établi dans la noticeStructure de recherche
Department of Veterinary Microbiology and Pathology — Washington State University, Agricultural Research Service et United States Department of Agriculture, avec 4 autres affiliations.
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