Three-dimensional super-resolution protein localization correlated with vitrified cellular context
Rattachement africain : cn. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
We demonstrate the use of cryogenic super-resolution correlative light and electron microscopy (csCLEM) to precisely determine the spatial relationship between proteins and their native cellular structures. Several fluorescent proteins (FPs) were found to be photoswitchable and emitted far more photons under our cryogenic imaging condition, resulting in higher localization precision which is comparable to ambient super-resolution imaging. Vitrified specimens were prepared by high pressure freezing and cryo-sectioning to maintain a near-native state with better fluorescence preservation. A 2-3-fold improvement of resolution over the recent reports was achieved due to the photon budget performance of screening out Dronpa and optimized imaging conditions, even with thin sections which is at a disadvantage when calculate the structure resolution from label density. We extended csCLEM to mammalian cells by introducing cryo-sectioning and observed good correlation of a mitochondrial protein with the mitochondrial outer membrane at nanometer resolution in three dimensions.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Three-dimensional super-resolution protein localization correlated with vitrified cellular context
- Date Crossref
- 14/10/2015
- Éditeur
- Springer Science and Business Media LLC
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Chinese Academy of Sciences pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Institute of Biophysics Center for Biological Imaging pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Huazhong University of Science and Technology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of Chinese Academy of Sciences pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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College of Life Science and Technology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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National Laboratory of Biomacromolecules pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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College of Life Sciences pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
Chinese Academy of Sciences, Center for Biological Imaging — Institute of Biophysics et Huazhong University of Science and Technology, avec 4 autres affiliations.
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