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Accès ouvert déclaré 2026 preprint

Subcellular pharmacology of a novel cell-permeable fluorescent phosphodiesterase inhibitor using advanced fluorescence microscopy

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6Institutions déclarées
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Rattachement africain : us, gb, it, de. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.

Le résumé fourni par la source

Abstract Direct visualisation of drug–target engagement within living cells remains a major challenge. Here we develop a cell-permeable fluorogenic analogue of the phosphodiesterase 4 (PDE4) inhibitor rolipram (MAN193), generated by conjugation to fluorescein diacetate. Following intracellular activation, the probe functions as a near-neutral PDE4 antagonist and enables direct visualisation of endogenous PDE4 populations. Using advanced fluorescence spectroscopy imaging approaches, including molecular brightness analysis and fluorescence anisotropy imaging, we demonstrate rolipram-displaceable binding of the analogue to cytosolic PDE4 and resolve thesubcellular distribution of binding sites. We further show that the probe enables visualisation of untagged PDE4 at focal adhesion complexes in cardiomyocyte-like cells. Together these findings establish fluorogenic drug conjugation combined with quantitative spectroscopy imaging as a generalisable strategy to map intracellular drug–target engagement with subcellular resolution, providing an effective framework for interrogating the spatial pharmacology of small molecules in living systems.

Ce résumé expose les affirmations des auteurs. BNTIC ne l’interprète pas comme une validation indépendante des résultats.

Le contrôle bibliographique ouvert

DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.

Titre Crossref
Subcellular pharmacology of a novel cell-permeable fluorescent phosphodiesterase inhibitor using advanced fluorescence microscopy
Date Crossref
26/08/2026
Éditeur
openRxiv
Type
posted-content

Ce recoupement confirme des métadonnées liées au DOI. Il ne confirme ni la méthode ni les conclusions de l’étude, et il ne compte pas comme une seconde source scientifique indépendante.

Où se fait cette recherche

  • Andrews University pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure
  • University of St Andrews pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure
  • University of Bologna pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure
  • Max Delbrück Center pays non établi dans la notice
    Structure de recherche
  • Philipps University of Marburg pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure
  • University of Liverpool Department of Biochemistry pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure
  • School of Physics and Astronomy pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure
  • Dipartimento di Chimica “Giacomo Ciamician” pays non établi dans la notice
    Institution
  • Marburg University Department of Pharmacy pays non établi dans la notice
    Université ou école supérieure

Andrews University, University of St Andrews et University of Bologna, avec 6 autres affiliations.

Une affiliation ne permet pas de déduire la nationalité d’un auteur.

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