Selection of Stable Reference Genes for qRT-PCR in Nurse Bee ( Apis mellifera) under Postmortem Conditions

Le résumé fourni par la source

서양꿀벌 (Apis mellifera)은 생태계의 안정성과 농업 생산성 유지에 중요한 역할을 하는 수분 매개 곤충으로, 최근 국내외에서 꿀벌 군집의 집단 폐사가 빈번히 보고되고 있다. 이러한 현상은 꿀벌 사체를 이용한 분자생물학적 분석을 통해 사망 원인을 규명할 수 있는 가능성을 제시하며, 이를 위해서는 사후 조건에서도 안정적으로 발현되는 기준 (reference) 유전자의 선별이 필수적이다. 본 연구에서는 사후 1일부터 7일까지 다양한 사후 경과일(postmortem interval, PMI)을 갖는 꿀벌 사체로부터 10종의 후보 reference 유전자 (RPS5, RPS18, GAPDH, ARF1, RAB1a, PPI, PGK, SDH, TBP, EF1)의 발현 안정성을 평가하였다. 이를 위해 머리 조직의 Cq 값 분포 분석과 함께 NormFinder, BestKeeper, geNorm, RefFinder 네 가지 알고리즘을 활용하였다. 또한, 다중 reference 유전자를 기반으로 정량화한 타겟 유전자 EcR의 발현량과 단일 reference 유전자를 이용한 결과 간의 통계적 유사성을 비교함으로써 최적의 reference 유전자를 선별하였다. 분석 결과, RAB1a는 모든 평가 지표에서 우수한 발현 안정성을 보였으며, 다중 reference 유전자를 활용한 정량화 결과와의 유사성 또한 가장 높아, 꿀벌 사체에서 타겟 유전자의 발현량을 정량화하는 데 적합한 단일 reference 유전자로 판단되었다. 또한 복부 조직은 부패와 오염에 취약하여 유전자 발현 분석에 부적합한 것으로 나타났으며, 꿀벌의 머리 조직을 활용한 분석이 보다 신뢰성 있는 결과를 제공함을 확인하였다. 본 연구는 꿀벌 사체에서의 유전자 발현 분석 기반 사후 생리학 연구에 기초자료를 제공하며, 꿀벌 집단 폐사의 원인 규명 및 사후 경과일 추정 연구에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

Ce résumé expose les affirmations des auteurs. BNTIC ne l’interprète pas comme une validation indépendante des résultats.