Single-molecule live-cell RNA imaging with CRISPR–Csm
Rattachement africain : us. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
Understanding the diverse dynamic behaviors of individual RNA molecules in single cells requires visualizing them at high resolution in real time. However, single-molecule live-cell imaging of unmodified endogenous RNA has not yet been achieved in a generalizable manner. Here, we present single-molecule live-cell fluorescence in situ hybridization (smLiveFISH), a robust approach that combines the programmable RNA-guided, RNA-targeting CRISPR-Csm complex with multiplexed guide RNAs for direct and efficient visualization of single RNA molecules in a range of cell types, including primary cells. Using smLiveFISH, we track individual native NOTCH2 and MAP1B transcripts in living cells and identify two distinct localization mechanisms including the cotranslational translocation of NOTCH2 mRNA at the endoplasmic reticulum and directional transport of MAP1B mRNA toward the cell periphery. This method has the potential to unlock principles governing the spatiotemporal organization of native transcripts in health and disease.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Single-molecule live-cell RNA imaging with CRISPR–Csm
- Date Crossref
- 18/02/2025
- Éditeur
- Springer Science and Business Media LLC
- Type
- journal-article
Ce recoupement confirme des métadonnées liées au DOI. Il ne confirme ni la méthode ni les conclusions de l’étude, et il ne compte pas comme une seconde source scientifique indépendante.
Où se fait cette recherche
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QB3 pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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Innovative Genomics Institute pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of California California Institute for Quantitative Biosciences (QB3) pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Howard Hughes Medical Institute pays non établi dans la noticeStructure de recherche
QB3, Innovative Genomics Institute et California Institute for Quantitative Biosciences (QB3) — University of California, avec 1 autre affiliation.
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