Single-molecule live-cell RNA imaging with CRISPR-Csm
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Le résumé fourni par la source
Abstract High-resolution, real-time imaging of RNA is essential for understanding the diverse, dynamic behaviors of individual RNA molecules in single cells. However, single-molecule live-cell imaging of unmodified endogenous RNA has not yet been achieved. Here, we present single-molecule live-cell fluorescence in situ hybridization (smLiveFISH), a robust approach that combines the programmable RNA-guided, RNA-targeting CRISPR-Csm complex with multiplexed guide RNAs for efficient, direct visualization of single RNA molecules in a range of cell types, including primary cells. Using smLiveFISH, we tracked individual endogenous NOTCH2 and MAP1B mRNA transcripts in living cells and identified two distinct localization mechanisms: co-translational translocation of NOTCH2 mRNA at the endoplasmic reticulum, and directional transport of MAP1B mRNA toward the cell periphery. This method has the potential to unlock principles governing the spatiotemporal organization of native transcripts in health and disease.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Single-molecule live-cell RNA imaging with CRISPR-Csm
- Date Crossref
- 16/07/2024
- Éditeur
- openRxiv
- Type
- posted-content
Ce recoupement confirme des métadonnées liées au DOI. Il ne confirme ni la méthode ni les conclusions de l’étude, et il ne compte pas comme une seconde source scientifique indépendante.
Où se fait cette recherche
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QB3 pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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Innovative Genomics Institute pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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University of California California Institute for Quantitative Biosciences (QB3) pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Howard Hughes Medical Institute pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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UC Berkeley/HHMI pays non établi dans la noticeInstitution
QB3, Innovative Genomics Institute et California Institute for Quantitative Biosciences (QB3) — University of California, avec 2 autres affiliations.
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