Eine universal nutzbare, von CD34-abgeleitete, Hinge-Domäne für die Behandlung von Kopf-Hals-Karzinomen sowie soliden und hämatologischen Erkrankungen mittels CAR T-Zelltherapie

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Hintergrund Die CAR T-Zelltherapie hat die Krebsbehandlung, besonders für hämatologische Erkrankungen, revolutioniert und steht im Fokus der Forschung für solide Tumore. CAR T-Zellen bestehen aus einem extrazellulären variablen Einzelkettenfragment eines monoklonalen Antikörpers, das mit einer Hinge an die Transmembran und intrazellulären Domänen gebunden wird, wodurch die Antigenerkennung und T-Zellaktivierung in einem einzigen Molekül kombiniert werden. Ziel der Arbeit ist die Hinge zu nutzen, um die CAR-T-Zellen zusätzlich zu stimulieren sowie ihre gezielte Eliminierung, Detektion und Anreicherung zu ermöglichen. Methoden Wir etablierten sechs auf der trunkierten Form von CD34 basierende, Hinge -Domänen, die das Epitop für den CD34 Antikörper (Qbend-10) enthielten. Die Fragmente wurden in lentivirale CAR-Konstrukte kloniert und die CAR-positiven T-Zellen über das MACS-System (Miltenyi) mit CD34-spezifischen Microbeads angereichert. Nach in vitro Funktionalitätsmessungen (FACS, Zytotoxizität) wurden die CARs mit C6- Hinge in vivo in NOD-SCID-gamma Mäusen getestet. Ergebnisse Ein endgültiges Konstrukt aus 99 Aminosäuren (C6) war der beste Kandidat für eine effiziente>95-%ige Anreicherung mittels MACS-System und ermöglicht ebenfalls die direkte Detektion der CARs auf den T-Zellen. Die C6- Hinge war sowohl in vitro, als auch in vivo, funktionell nicht von der zugelassenen CD8α- Hinge zu unterscheiden. Schlussfolgerung Wir zeigen, dass unsere CD34 C6- Hinge -Domäne, für eine Vielzahl verschiedener CARs und Malignome verwendet werden kann. Sie hat eine hohe Abtötungseffizienz ohne unspezifische Aktivierung durch Zielantigen-negative Zellen zu vermitteln. Dadurch ist die neue C6- Hinge ideal für CARs in klinischen Anwendungen, inklusive Kopf-Hals-Karzinome, geeignet. Düsseldorf School of Oncology Publication History Article published online: 24 May 2022 © 2022. The Author(s). This is an open access article published by Thieme under the terms of the Creative Commons Attribution-NonDerivative-NonCommercial-License, permitting copying and reproduction so long as the original work is given appropriate credit. Contents may not be used for commercial purposes, or adapted, remixed, transformed or built upon. (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/). Georg Thieme Verlag Rüdigerstraße 14, 70469 Stuttgart, Germany

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