DMSO-Quenched H/D-Exchange 2D NMR Spectroscopy and Its Applications in Protein Science
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Hydrogen/deuterium (H/D) exchange combined with two-dimensional (2D) NMR spectroscopy has been widely used for studying the structure, stability, and dynamics of proteins. When we apply the H/D-exchange method to investigate non-native states of proteins such as equilibrium and kinetic folding intermediates, H/D-exchange quenching techniques are indispensable, because the exchange reaction is usually too fast to follow by 2D NMR. In this article, we will describe the dimethylsulfoxide (DMSO)-quenched H/D-exchange method and its applications in protein science. In this method, the H/D-exchange buffer is replaced by an aprotic DMSO solution, which quenches the exchange reaction. We have improved the DMSO-quenched method by using spin desalting columns, which are used for medium exchange from the H/D-exchange buffer to the DMSO solution. This improvement has allowed us to monitor the H/D exchange of proteins at a high concentration of salts or denaturants. We describe methodological details of the improved DMSO-quenched method and present a case study using the improved method on the H/D-exchange behavior of unfolded human ubiquitin in 6 M guanidinium chloride.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- DMSO-Quenched H/D-Exchange 2D NMR Spectroscopy and Its Applications in Protein Science
- Date Crossref
- 10/06/2022
- Éditeur
- MDPI AG
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Tokyo University of Science pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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The University of Tokyo pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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National Institutes of Natural Sciences pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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The Graduate University for Advanced Studies pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Nagoya City University pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Institute for Molecular Science pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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School of Science Department of Physics pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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School of Physical Sciences Department of Functional Molecular Science pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Graduate School of Pharmaceutical Sciences pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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