Efficient site specific removal of a C-terminal FLAG fusion from a Fab′ using copper(II) ion catalysed protein cleavage
Rattachement africain : gb. Niveau de preuve : code pays fourni par la source.
Le résumé fourni par la source
The peptide sequence (N)DKTH(C) was investigated as a site for efficient, specific cleavage of a fusion protein by cupric ions using a humanised gamma1 Fab' as a model protein. The native upper hinge (N)DKTH(C) sequence was mutated to create a site resistant to cleavage by cupric ions and a (N)DKTH(C) sequence introduced between the hinge and a C-terminal FLAG peptide. Incubation of Fab' with Cu2+ at 62 degrees C at alkaline pHs resulted in removal of the FLAG peptide with efficiencies of up to 86%. Cleavage conditions did not detrimentally affect the Fab' protein. Use of the (N)DKTH(C) sequence along with cupric ions may provide a cost-effective method for large scale proteolytic cleavage of fusion proteins.
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Le contrôle bibliographique ouvert
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- Titre Crossref
- Efficient site specific removal of a C-terminal FLAG fusion from a Fab′ using copper(II) ion catalysed protein cleavage
- Date Crossref
- 01/02/1999
- Éditeur
- Oxford University Press (OUP)
- Type
- journal-article
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Les institutions déclarées
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