Random mutagenesis of yeast 25S rRNA identify bases critical for 60S subunit structural integrity and function
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Le résumé fourni par la source
In yeast Saccharomyces cerevisiae, 25S rRNA makes up the major mass and shape of the 60S ribosomal subunit. During translation initiation, the 60S subunit joins the 40S initiation complex, producing the 80S initiation complex. During elongation, the 60S subunit binds the CCA-ends of aminoacyl- and peptidyl-tRNAs at the A-loop and P-loop, respectively, transferring the peptide onto the α-amino group of the aminoacyl-tRNA. To study the role of 25S rRNA in translation in vivo, we randomly mutated 25S rRNA and isolated and characterized seven point mutations that affected yeast cell growth and polysome profiles. Four of these mutations, G651A, A1435U, A1446G and A1587G, change a base involved in base triples crucial for structural integrity. Three other mutations change bases near the ribosomal surface: C2879U and U2408C alter the A-loop and P-loop, respectively, and G1735A maps near a Eukarya-specific bridge to the 40S subunit. By polysome profiling in mmslΔ mutants defective in nonfunctional 25S rRNA decay, we show that some of these mutations are defective in both the initiation and elongation phases of translation. Of the mutants characterized, C2879U displays the strongest defect in translation initiation. The ribosome transit-time assay directly shows that this mutation is also defective in peptide elongation/termination. Thus, our genetic analysis not only identifies bases critical for structural integrity of the 60S subunit, but also suggests a role for bases near the peptidyl transferase center in translation initiation.
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Le contrôle bibliographique ouvert
DOI retrouvé dans Crossref DOI retrouvé ; titre concordant.
- Titre Crossref
- Random mutagenesis of yeast 25S rRNA identify bases critical for 60S subunit structural integrity and function
- Date Crossref
- 01/07/2013
- Éditeur
- Informa UK Limited
- Type
- journal-article
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Où se fait cette recherche
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Kansas State University Division of Biology pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Institut thématique Génétique pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Manhattan High School pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Kyoto University Insititute for Virus Research pays non établi dans la noticeUniversité ou école supérieure
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Baruch S. Blumberg Institute pays non établi dans la noticeOrganisation à but non lucratif
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National Institutes of Health pays non établi dans la noticeOrganisme public
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Gene Therapy Laboratory pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development pays non établi dans la noticeStructure de recherche
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Genomics (United Kingdom) pays non établi dans la noticeEntreprise
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Division of Biology pays non établi dans la noticeInstitution
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Molecular Cellular and Developmental Biology Program pays non établi dans la noticeInstitution
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Insititute for Virus Research pays non établi dans la noticeInstitution
Division of Biology — Kansas State University, Institut thématique Génétique et Manhattan High School, avec 9 autres affiliations.
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